INGEGNERIA DELLE MACROMOLECOLE BIOLOGICHE ( cod. 1001311)

- Isolamento di un gene specifico (cDNA, regione del genoma che lo contiene). - Analisi trascrizionale del gene di cui è stato isolato il cDNA. - Analisi della struttura della regione del genoma contenente il gene di interesse. - Espressione in batteri della proteina codificata dal gene. - Mutagenesi del gene e della proteina ricombinante che esso codifica. - Sintesi chimica di DNA e creazione di geni artificiali. - Clonaggio genico in batteri diversi da E.coli. - Espressione di proteine eterologhe in B.subtilis - Espressione di proteine eterologhe in Streptomyces - Clonaggio genico in S.cerevisiae e altri funghi - Espressione di proteine eterologhe in S.cerevisiae - Espressione di proteine eterologhe in P.pastoris - Preparazione di genoteche di espressione in lievito - Complementazione funzionale in S.cerevisiae - Knock-out genico in lievito - Sistema dei due ibridi - Clonaggio genico in cellule animali - Vettori plasmidici per l’espressione transiente(con e senza repliconi) - Vettori plasmidici per l’espressione stabile (con repliconi e di integrazione) - Co-trasformazione e amplificazione genica - Effetto posizione e rimedi - Trasduzione virale - Sistema del baculovirus e del virus vaccinia - Adenovirus, AAV e retrovirus - Preparazione di animali transgenici - Trasfezione di cellule ES di topo - Trasferimento nucleare e clonaggio di interi organismi - “Gene-targeting" e "knock-out" genico in animali. - Ricombinazione sito-specifica in cellule animali - Mutagenesi sito-specifica in cellule animali - Ingegneria cromosomica - Mutanti condizionali in topo - Knock-out funzionale (RNA interference, ribozimi) - Sistemi di espressione inducibili in animali