Obiettivi formativi
L’obiettivo del corso è quello di fornire agli studenti una conoscenza teorica e pratica delle metodologie alla base delle tecnologie ricombinanti.
Al termine del corso, lo studente dovrebbe essere in grado di:
- capire l'importanza e le finalità del clonaggio genico e conoscere le principali tecniche e gli strumenti necessari per manipolare in vitro ed in vivo le macromolecole biologiche (CONOSCENZA E CAPACITÀ DI COMPRENSIONE).
- Progettare la strategia migliore per effettuare l’inserimento di un frammento di DNA d’interesse in un vettore di clonaggio, definendo le metodologie analitiche necessarie per svolgere in modo corretto l’analisi dei cloni ricombinanti. Essere in grado stilare un rapporto di ricerca per esporre i risultati ottenuti (CAPACITÀ DI APPLICARE CONOSCENZA E COMPRENSIONE).
- Saper valutare quale metodologia sia la migliore per eseguire un esperimento di clonaggio genico (AUTONOMIA DI GIUDIZIO).
- Essere in grado di esporre i risultati ottenuti in un esperimento di clonaggio genico in modo chiaro e pertinente anche ad un pubblico non esperto (ABILITÀ COMUNICATIVE).
- Essere in grado di comprendere testi di natura tecnica e specialistica, utilizzando fonti in lingua italiana ed in lingua inglese (CAPACITÀ DI APPRENDIMENTO).
Prerequisiti
Sono necessarie conoscenze di biologia generale, microbiologia, chimica e biochimica.
Contenuti dell'insegnamento
- I principi fondamentali del clonaggio genico
- Enzimi utilizzati in ingegneria genetica
- Isolamento e purificazione di DNA genomico e plasmidico
- Elettroforesi di acidi nucleici
- Vettori di clonaggio batterici
- Vettori fagici: lambda e M13
- Sintesi in vitro di DNA (PCR)
- Mutagenesi mediata da PCR
- Vettori di clonaggio eucariotici
- Costruzione ed analisi di librerie genomiche
- Purificazione di RNA messaggero e conversione in cDNA
- Costruzione ed analisi di librerie a cDNA
- Sequenziamento del DNA
Programma esteso
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Bibliografia
- Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction, 7th Edition. Terry A. Brown. Zanichelli
- Dai geni ai genomi. Dale, von Schantz – EdiSES
- Analisi dei geni e genomi. Richard J.Reece – EdiSES
- Ingegneria genetica. Principi e tecniche. S. Primrose et al. Zanichelli
- DNA Ricombinante - J.D.Watson et al. Zanichelli
- Molecular biotechnology : principles and applications of recombinant DNA. Glick, Bernard R.
- Molecular biology: principles of genome function. Oxford university press
Metodi didattici
Il corso è organizzato in:
- lezioni frontali da parte del docente;
- esercitazioni in aula;
- esercitazioni pratiche in laboratorio.
I metodi didattici potrebbero subire variazioni a causa dell'emergenza sanitaria.
Modalità verifica apprendimento
L'esame è organizzato in una prova scritta della durata massima di due ore che consiste di:
- tre domande a risposta aperta sui diversi argomenti affrontati durante il corso;
- due domande con esercizi (sul clonaggio genico e la PCR).
Per poter sostenere l’esame lo studente deve preparare una relazione sulle esercitazioni svolte in laboratorio che verrà consegnata il giorno della prova scritta.
La prova scritta e la relazione sui laboratori permettono di verificare le conoscenze acquisite, la capacità dello studente di applicarle a problemi pratici di laboratorio e la sua autonomia di giudizio.
Altre informazioni
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